益气通脉方调控PI3K/AKT信号通路改善脑缺血再灌注损伤大鼠神经元凋亡

摘要：

目的:基于磷脂酰肌醇3-激酶/蛋白激酶B(phosphatidylinositol 3-kinases/protein kinase B,PI3K/AKT)信号通路探讨益气通脉方对大脑中动脉阻塞再灌注(middle cerebral artery occlusion and recirculate,MCAO/R)模型大鼠神经功能损伤及凋亡的作用机制.方法:从68 只健康SPF级雄性SD大鼠中选取 12 只为假手术组,其余大鼠采用改良线栓法制备MCAO/R模型.将36 只MACO/R模型成功大鼠分为模型组、益气通脉方组(1.08 g·kg-1)和尼莫地平片组(10.8 mg·kg-1),每组12 只,给予大鼠进行相应药物干预,灌胃体积10 mL·kg-1,连续14 d,每天1 次.假手术组和模型组大鼠灌胃给予等体积生理盐水.选用改良神经功能缺损程度评分(modified neurological severity score,mNSS)法评估大鼠的神经功能;HE染色观察各组大鼠脑组织形态改变;TUNEL染色检测细胞凋亡情况;Western blot检测缺血半暗带脑组织PI3K、p-PI3K、AKT、p-AKT、B淋巴细胞瘤-2(B cell lymphoma-2,Bcl-2)、Bcl-2 相关的X基因(Bcl2-associated X,Bax)的蛋白表达水平;RT-qPCR法检测大鼠脑组织Bax mRNA、Bcl-2 mRNA表达水平.结果:与假手术组比较,模型组大鼠mNSS评分、神经细胞凋亡率、Bax蛋白及基因的相对表达量显著升高(P＜0.01),p-PI3K/PI3K、p-AKT/AKT的比值显著下调(P＜0.01),Bcl-2 蛋白及基因的相对表达量均显著下调(P＜0.01);与模型组比较,益气通脉方组大鼠第 3、7、14 天mNSS评分明显降低(P＜0.05),神经细胞凋亡率、Bax蛋白及基因的相对表达量明显下降(P＜0.05),p-PI3K/PI3K、p-AKT/AKT的比值显著升高(P＜0.01),Bcl-2 蛋白及基因的相对表达量均显著升高(P＜0.01).HE染色显示,模型组大鼠脑组织神经细胞明显减少,细胞核固缩或消失,细胞破裂明显,出现空腔和炎症细胞浸润,部分神经元坏死变性,排列不规整,组织间质水肿,层次不清;益气通脉方组大鼠脑组织细胞数目明显增多,细胞核皱缩形态改善,空腔及炎症因子减少,组织间质水肿减轻,变性坏死的神经细胞明显减少,脑组织细胞形态结构明显恢复.结论:益气通脉方可激活PI3K/AKT信号通路,调控下游凋亡相关因子Bax、Bcl-2 的表达,从而发挥抗细胞凋亡及保护MCAO/R后受损脑组织的作用.

关键词：益气通脉方、PI3K/AKT信号通路、神经元细胞凋亡、脑缺血再灌注损伤

所属期刊栏目：39

分类号：R285.5(中药学)

资助基金：河南省科技攻关计划项目;河南省科技攻关计划项目;国家中医药管理局科学研究基金

在线出版日期：2024-01-24（万方平台首次上网日期，不代表论文的发表时间）

页数：共8页

页码：63-70