基于PI3K/AKT/eNOS通路研究芪丹通脉片对ApoE-/-小鼠动脉粥样硬化易损斑块的影响

摘要：

目的:基于磷脂酰肌醇-3-激酶(phosphatidylinositol-3-hydroxykinase,PI3K)/蛋白激酶B(protein kinase B,AKT)/内皮型一氧化氮合酶(endothelial nitric oxide synthase,eNOS)通路探索芪丹通脉片对ApoE-/-小鼠动脉粥样硬化易损斑块的影响.方法:从72 只SPF级雄性ApoE-/-小鼠中随机选取12 只作为对照组,其余小鼠采用颈总动脉外置管术联合高脂饲料建立小鼠易损斑块模型.将造模成功的60 只小鼠随机分为模型组、黄芪甲苷组(40 mg·kg-1)、丹参酮ⅡA组(90 mg·kg-1)、黄芪甲苷+丹参酮ⅡA组、芪丹通脉片组(700 mg·kg-1),每组12 只,给予相应药物灌胃12 周,每日1 次,对照组和模型组给予等体积生理盐水.末次灌胃后,处死小鼠并分离右颈总动脉,TUNEL染色观察细胞凋亡情况,免疫荧光染色检测CD68、α-actin蛋白表达水平,RT-PCR检测eNOS mRNA表达水平,Western Blot检测p-PI3K/PI3K、p-AKT/AKT、eNOS、基质金属蛋白酶(matrix metalloprotein-9,MMP-9)蛋白表达水平.结果:TUNEL结果显示:对照组平滑肌细胞几乎没有凋亡,模型组平滑肌细胞凋亡最多;与模型组比较,各给药组平滑肌细胞凋亡明显减少;黄芪甲苷+丹参酮ⅡA组、芪丹通脉片组平滑肌细胞凋亡较黄芪甲苷组、丹参酮ⅡA组有所减少.CD68、α-actin免疫荧光结果显示:对照组几乎没有巨噬细胞,而平滑肌细胞数量最多;与对照组比较,模型组巨噬细胞数量明显增多,而平滑肌细胞数量显著减少;与模型组比较,各给药组巨噬细胞数量明显减少,而平滑肌细胞数量明显增多;与黄芪甲苷组、丹参酮ⅡA组比较,黄芪甲苷+丹参酮ⅡA组、芪丹通脉片组巨噬细胞数量明显减少,而平滑肌细胞数量明显增多.RT-PCR结果显示:与对照组比较,模型组eNOS mRNA表达水平显著降低(P＜0.05);与模型组比较,各给药组eNOS mRNA表达水平显著升高(P＜0.05);与黄芪甲苷组、丹参酮ⅡA组比较,黄芪甲苷+丹参酮ⅡA组、芪丹通脉片组eNOS mRNA表达水平显著升高(P＜0.05).Western Blot结果显示:与对照组比较,模型组p-PI3K/PI3K、p-AKT/AKT、eNOS蛋白表达水平显著降低,MMP-9 蛋白表达水平显著升高(P＜0.05);与模型组比较,各给药组p-PI3K/PI3K、p-AKT/AKT、eNOS蛋白表达水平显著升高,MMP-9 蛋白表达水平显著降低(P＜0.05);与黄芪甲苷组、丹参酮ⅡA组比较,黄芪甲苷+丹参酮ⅡA组、芪丹通脉片组p-PI3K/PI3K、p-AKT/AKT、eNOS蛋白表达水平显著升高,MMP-9 蛋白表达水平显著降低(P＜0.05).结论:芪丹通脉片能够稳定动脉粥样硬化易损斑块,其机制可能与激活PI3K/AKT/eNOS信号通路有关.

关键词：芪丹通脉片、PI3K/AKT/eNOS、易损斑块、细胞凋亡、动脉粥样硬化

所属期刊栏目：39

分类号：R285.5(中药学)

资助基金：国家自然科学基金;陕西省自然科学基础研究计划项目;西安市科技计划项目;陕西中医药大学非直属附属医院项目

在线出版日期：2024-01-24（万方平台首次上网日期，不代表论文的发表时间）

页数：共8页

页码：55-62