基于Nrf2/Keap1信号通路研究黄芩甲苷对糖尿病肾病模型小鼠肾损伤的作用

摘要：

目的:基于核转录因子E2相关因子2(nuclear factor E2-related factor 2,Nrf2)/Kelch样环氧氯丙烷相关蛋白1(Kelch-like ech-associated protein 1,Keap1)信号通路研究黄芩甲苷对糖尿病肾病(diabetic nephropathy,DN)小鼠肾损伤的作用.方法:从60只C57BL/6小鼠中随机选择20只,分为对照组、正常+黄芩甲苷组,每组10只,其余40只小鼠制备DN模型.将建模成功的小鼠随机分为DN组、DN+黄芩甲苷组、DN+LV-Keap1组、DN+LV-control组,每组10只,药物持续干预10周.采用高糖诱导SV40-Mes-13细胞后,进行pcDNA-Keap1、si-Keap1、miR-142 inhibitor、miR-Keap1mimic转染,转染后的细胞分组并进行药物干预.化学比色法检测SV40-Mes-13细胞培养上清液中SOD的活性;RT-qPCR检测肾组织中miR-142 mRNA的表达水平;Western Blot检测Nrf2、Keap1、HO-1蛋白表达水平;流式细胞仪检测SV40-Mes-13细胞凋亡.结果:与对照组比较,DN组miR-142 mRNA表达水平明显升高,Keap1、Nrf2蛋白表达水平明显降低;与DN组比较,DN+黄芩甲苷组miR-142 mRNA表达水平明显降低,Keap1、Nrf2蛋白表达水平明显升高;与DN+LV-control组比较,DN+LV-Keap1组Keap1、Nrf2、HO-1蛋白表达水平明显升高;与葡萄糖+NC组比较,葡萄糖+miR-142 inhibitor组Keap1、Nrf2蛋白表达水平及SOD水平明显升高,细胞凋亡率明显降低;与葡萄糖+miR-142 inhibitor组比较,葡萄糖+miR-142 inhibitor+si-Keap1组Keap1、Nrf2蛋白表达水平及SOD水平明显降低,细胞凋亡率明显升高;与葡萄糖+黄芩甲苷+pre-NC组比较,葡萄糖+黄芩甲苷+miR-142 mimic组Keap1、Nrf2蛋白表达水平及SOD水平明显降低,细胞凋亡率明显升高;与葡萄糖+黄芩甲苷+miR-142 mimic+pcDNA组比较,葡萄糖+黄芩甲苷+miR-142 mimic+pcDNA-Keap1组Keap1、Nrf2蛋白表达水平及SOD水平明显升高,细胞凋亡率明显降低,差异均具有统计学意义(P＜0.05).结论:黄芩甲苷可逆转miR-142对Nrf2/Keap1信号通路的抑制作用进而改善糖尿病肾病肾损伤.

关键词：糖尿病肾病、黄芩甲苷、miR-142、Nrf2/Keap1信号通路、小鼠

所属期刊栏目：37

分类号：R285.5(中药学)

资助基金：湖北省卫生健康委员会科研项目WJ2017M187

在线出版日期：2023-02-22（万方平台首次上网日期，不代表论文的发表时间）

页数：共7页

页码：2657-2663