黑曲霉糖化酶工业菌株CBS 513.88原生质体制备条件的优化

摘要：

[目的]优化黑曲霉糖化酶工业菌株CBS 513.88原生质体制备条件,促进其基础研究和分子改造.[方法]通过考察酶解液成分与比例、酶解条件、渗透压稳定剂和菌体生长条件对黑曲霉CBS 513.88原生质体制备的影响,优化其制备条件,并通过聚乙二醇介导的原生质体转化方法测试原生质体的转化效率.[结果]适合黑曲霉CBS 513.88原生质体制备的材料为改良ME培养基培养10 h的菌丝,酶解条件为在10 g·L-1溶壁酶Glucanex®和10 g·L-1蛋清溶菌酶的破壁酶溶液(pH值5.8)33 ℃、110 r·min-1酶解1.5 h,渗透压稳定剂为0.7 mol·L-1 KCl+0.27 mol·L-1 CaCl2.在此制备条件下,原生质体悬液含量最高可达2×107个·mL-1;原生质体再生培养基为添加0.7 mol·L-1 KC1的ME培养基,其最大再生率为52％;转化率最高为206个·μg-1 DNA(质粒),阳性率为94.4％.[结论]通过对黑曲霉CBS 513.88原生质体制备条件的优化,建立短时高效的原生质体介导遗传转化体系.

关键词：黑曲霉CBS 513.88、原生质体制备、原生质体再生、原生质体介导转化、遗传转化体系

所属期刊栏目：58

分类号：Q935(微生物学)

资助基金：国家自然科学基金32171476

在线出版日期：2024-08-15（万方平台首次上网日期，不代表论文的发表时间）

页数：共9页

页码：592-600