利用pGenesil-1.0构建人Dna2真核表达干扰载体

摘要：

目的:构建人基因Dna2干扰(RNAi)的真核表达载体.方法:根据GenBank上人Dna2的cDNA序列设计并合成两条单链寡核苷酸,退火以后,插入质粒pGenesil-1.0多克隆位点的BamHⅠ和Hind Ⅲ之间进行重组,构建重组干扰载体,转化DH5α后测序鉴定出阳性菌株.重组质粒以脂质体法转染HeLa细胞,提取Dna2蛋白以免疫印迹法检验干扰效果.结果:设计的目的干扰序列5'-catagccagtagtattcgatg 3'可明显抑制Dna2在HeLa细胞的表达.结论:利用pGenesil-1.0构建的人Dna2干扰载体适用于该基因功能研究.

关键词：pGenesil-1.0、Dna2、RNA干扰、载体构建

所属期刊栏目：42

分类号：Q71(生物大分子的结构和功能)

资助基金：国家自然科学基金31170733;河南师范大学国家大学生创新创业训练计划项目

在线出版日期：2014-05-23（万方平台首次上网日期，不代表论文的发表时间）

页数：共5页

页码：147-151