幽门螺杆菌重组VacA蛋白的表达、纯化和鉴定

摘要：

建立从幽门螺杆菌空泡毒素A(VacA)原核表达系统pET32a-vacA-E.coliBL21 DE3中,表达、纯化和鉴定重组空泡毒素A(rVacA)蛋白的方法.采用不同浓度的IPTG(0.1、0.5和1.0 mmol·L-1)诱导原核表达系统表达rVacA,10%SDS-PAGE检测表达产量,Ni-NTA亲和层析法纯化rVacA,采用HPLC检测其纯度,Western-blotting进行免疫学鉴定.从已构建的VacA原核表达系统中成功表达和纯化了rVacA蛋白,产量约占细菌总蛋白的28.4%,纯度为82.3%.为后续进一步研究该蛋白的生物活性和相关检测试剂盒奠定基础.

关键词：幽门螺杆菌、空泡毒素A、原核表达、纯化、鉴定

所属期刊栏目：37

分类号：R377;R392.2(医学微生物学（病原细菌学、病原微生物学）)

资助基金：浙江省"新苗人才计划"项目2008R40G2190021;嘉兴学院大学生研究训练SRT项目857108083

在线出版日期：2010-01-18（万方平台首次上网日期，不代表论文的发表时间）

页数：共4页

页码：129-132