青蒿α-bisabolol合酶产物绝对构型的确定

摘要：

建立气相和液相色谱方法用于鉴定α-没药醇(α-bisabolol)绝对构型,确定青蒿α-bisabolol合酶产物的绝对构型.手性液相方法分离并制备α-bisabolol的4种立体异构体,结合旋光度测定、气相色谱和标准品确定4种立体异构体的绝对构型.分别建立气相和液相色谱2种方法来鉴定α-bisabolol的4种立体异构体混合物.化学合成酶促反应的底物法尼基焦磷酸(farnesyl pyrophosphate,FPP),原核表达、蛋白纯化后进行体外催化,鉴定2个α-bisabolol合酶体外催化产物α-bisabolol的绝对构型.甜舌草α-bisabolol合酶(Lippia dulcis bisabolol synthase,LdBOS)体外催化FPP,产物构型为(+)-epi-α-bisabolol,与文献报道一致.青蒿α-bisabolol合酶(Artemisia annua bisabolol synthase,AaBOS)体外催化FPP生成的产物为(+)-α-bisabolol.Agilent CP-Chirasil-Dex-CB气相色谱柱和Chiralpak IA液相色谱柱可分别用以分离、鉴定α-bisabolol的4种手性异构体.AaBOS和LdBOS的催化产物6位碳构型相同,暗示这2种酶与青蒿紫穗槐二烯合酶(Artemisia annua amorpha-4,11-diene synthase,AaADS)的催化机理类似.利用气相和液相色谱的方法分析手性化合物,具有灵敏度高、稳定性强、简便易行等优点.手性化合物α-bisabolol绝对构型的分离、鉴定,在医药、食品和化工领域具有重要意义.

关键词：没药醇合酶、倍半萜、青蒿、立体异构体、α-没药醇

所属期刊栏目：40

分类号：Q785(基因工程（遗传工程）)

资助基金：国家自然科学基金资助项目31570305;30900111

在线出版日期：2020-09-11（万方平台首次上网日期，不代表论文的发表时间）

页数：共6页

页码：409-414