人细胞色素P450氧化还原酶的克隆表达和抗体的制备

摘要：

细胞色素P450还原酶(CPR)是人细胞色素P450酶系的电子供给者,对后者活性的发挥起到重要作用.本研究将从人胚胎cDNA文库中得到的人CPR的编码基因,连接入pT7450表达载体中,在大肠杆菌BL21(DE3)中高效表达并纯化.每升发酵液可得到纯化蛋白49 mg,占总蛋白含量的10%,以细胞色素C为底物检测酶活性,比活为65 u/mg.利用纯化的CPR作为抗原,常规免疫纯系大耳家兔,获得高效价、高特异性的抗血清,抗体滴度为1:200 000(EUSA法),纯化后抗体应用于不同组织中CPR含量的评价,证明重组CPR及其抗体可用于细胞色素P450的体外药物代谢及细胞色素P450与CPR作用机理的研究.

关键词：人细胞色素P450还原酶、克隆、表达、抗体、药物代谢

所属期刊栏目：26

分类号：Q786(基因工程（遗传工程）)

资助基金：国家科技攻关项目2003AA223061

在线出版日期：2006-03-30（万方平台首次上网日期，不代表论文的发表时间）

页数：共7页

页码：70-76