10.14135/j.cnki.1006-3080.20180830001
Kap147/Kpn杂合启动子引导Cre重组酶在转基因小鼠 睾丸组织中特异性表达
为了验证杂合启动子Kap147/Kpn的体内 、 外功能,构建了Kap147/Kpn引导的Cre重组酶转基因鼠.体外细胞转染和激素诱导证实Kap147/Kpn启动子具有细胞特异性,且受雄激素诱导.通过RT-PCR(Reverse Transcription-Polymerase Chain Reaction)和荧光定量PCR(Polymerase Chain Reaction)证实Kap147/Kpn启动子引导Cre重组酶在转基因鼠(Cre-F0-2)睾丸组织中特异表达.荧光定量PCR检测发现,Cre mRNA在转基因鼠睾丸中的表达量与小鼠年龄相关,经15 mg/(kg·d)二氢睾酮(DHT)处理后睾丸中Cre mRNA表达量增加1.7倍,经100 mg/(kg·d)醋酸环丙孕酮(CAP)处理后Cre mRNA表达量降低约50%,证实Kap147/Kpn启动子在转基因鼠体内受雄激素调控.荧光组化显示,转基因鼠Cre-F0-2与双荧光Cre重组酶报告鼠杂交后,能成功介导子代鼠睾丸组织特异性的基因敲除.杂合启动子Kap147/Kpn引导的Cre重组酶转基因鼠(Cre-F0-2)具有雄激素调节性和睾丸靶向性,是一个潜在的研究睾丸基因功能的有力工具.
基因打靶、肾脏雄激素调节蛋白、Cre转基因鼠、睾丸
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Q291
国家自然科学基金81071252
2020-01-13(万方平台首次上网日期,不代表论文的发表时间)
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