重组艰难梭状芽孢杆菌毒素TcdB对人体肠上皮细胞层功能的影响

摘要：

利用Transwell小室体外建立人结肠细胞T84上皮细胞层,分析不同质量浓度重组艰难梭状芽孢杆菌毒素TcdB(1 000、100、10 ng/mL)对上皮细胞层跨膜电阻(TER)的影响；通过免疫荧光染色分析TcdB对上皮细胞层结构的影响；运用荧光标记葡聚糖作为指示剂,检测毒素作用后上皮细胞层的旁通路渗透情况；通过细胞毒性分析,检测上皮细胞层功能受损情况下,TcdB的跨膜渗透.结果发现:重组艰难梭状芽孢杆菌毒素TcdB能引起剂量依赖性单层上皮组织跨膜电阻降低和渗透性增加,在24 h内质量浓度为1 000、100、10 ng/mL的TcdB能导致上皮细胞层分别丧失100％、70％、50％电阻力,同时分别引起30％、20％、10％的葡聚糖渗透；上皮细胞层受损后,大分子毒素通过旁通路的非正常跨膜渗透也增加.共聚焦分析显示上皮细胞层的细胞间紧密连接结构受损.综上所述,艰难梭状芽孢杆菌毒素TcdB介导的体外培养人T84肠上皮细胞层功能损伤主要表现为电生理学功能异常,旁通路渗透性增加,细胞间紧密连接结构破坏.

关键词：艰难梭状芽孢杆菌、毒素TcdB、上皮细胞层、跨膜电阻、渗透性

所属期刊栏目：39

分类号：Q393.124(人类遗传学)

资助基金：广东省科技计划项目2011B050400016

在线出版日期：2016-05-06（万方平台首次上网日期，不代表论文的发表时间）

页数：共6页

页码：161-166