鼠源抗过敏融合蛋白的瞬时表达及纯化
采用流加和降温培养工艺,实现在5 L搅拌式生物反应器规模的瞬时基因表达。首先比较了两种表达载体在CHO-S细胞中的瞬时基因表达,发现pID-mAAFP载体介导的瞬时转染表达可以获得mAAFP的高水平表达。采用pID-mAAFP载体在1.3 L搅拌式生物反应器中进行瞬时基因表达,与分批培养相比,通过流加和降温培养工艺对转染过程进行控制,培养时间延长1倍,蛋白表达浓度提高8倍。在5 L搅拌式生物反应器中对上述工艺进行成功放大,mAAFP质量浓度达到25 mg/L。之后,利用rProtein A Sepharose Fast Flow介质纯化mAAFP,并通过SDS-PAGE、Western blot验证其纯度,为下一步利用小鼠模型研究蛋白功效和作用机理做好准备。
融合蛋白、瞬时基因表达、中国仓鼠卵巢细胞、过敏
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Q78(基因工程（遗传工程）)
国家反应器重点实验室开放课题基金2009ZX09503-013-2;国家科技重大专项2009ZX09102-249
2012-04-21（万方平台首次上网日期，不代表论文的发表时间）
532-537
