以MDR1基因启动子为靶点的药物筛选模型的建立

摘要：

通过构建以MDR1启动子为启动序列的荧光素酶报告基因载体,建立基于双荧光素酶报告基因系统的多药耐药抑制剂筛选模型.从HCT-8细胞中提取DNA并克隆含有MDR1基因启动子的序列.将该序列重组到荧光素酶报告基因载体pGL-3-Basic的启动区域中,从而构建报告基因载体pGL-MDR1.将 pGL-MDR1和pRL-TK载体共转染到HCT-8 和HCT-8/VCR细胞中,建立用于筛选多药耐药抑制剂的方法.通过调节不同载体的比例来优化转染效率.通过MDR1基因激活剂(热诱导)和抑制剂(EGCG)来验证该方法.通过直接测序法验证了pGL-MDR1含有MDR1基因启动子序列且没有出现碱基突变.在n(pGL-MDR1)∶n(pRL-TK)=5∶5时,转染效率最高并具有最高的荧光素酶活性.通过MDR1基因激活处理后表现为时间依赖性地激活MDR1基因的表达,而MDR1基因抑制剂的作用则相反.

关键词：MDR1基因、双荧光素酶报告基因、药物筛选

所属期刊栏目：34

分类号：R966(药理学)

在线出版日期：2008-12-10（万方平台首次上网日期，不代表论文的发表时间）

页数：共5页

页码：650-653,674