B淋巴细胞刺激因子基因的克隆及在大肠杆菌中的高效表达

摘要：

聚合酶链式反应(PCR)扩增获得了编码BLys(134-285AA)的cDNA片段,该片段以限制性内切酶BglⅡ和HindⅢ双酶切插入pET32a载体.测序表明除(ATA263→ATG263)突变并导致了氨基酸(1263M)突变外,其余序列与Genbank报道的序列一致.蛋白表达用异丙基-β-D-硫代半乳糖苷(IPTG)诱导,SDS-PAGE表明:在33 ku处有明显的融合蛋白表达,其表达水平高达总菌体蛋白的50%.点印迹证实融合蛋白能与anti-His6Tag抗体反应.生物学活性研究表明BLys协同丝裂霉素能明显地抑制HeLa细胞的生长.

关键词：B淋巴细胞刺激因子、大肠杆菌、克隆和表达、丝裂霉素、协同作用

所属期刊栏目：31

分类号：Q786(基因工程（遗传工程）)

资助基金：上海市重点学科建设项目

在线出版日期：2005-05-19（万方平台首次上网日期，不代表论文的发表时间）

页数：共4页

页码：249-252