基于PINK1/Parkin线粒体自噬通路探讨骨痹方抗膝骨关节炎的机制研究

摘要：

目的 观察骨痹方调控PTEN诱导假定激酶1(PINK1)/E3泛素连接酶(Parkin)线粒体自噬通路抗膝骨关节炎的机制.方法 构建双荧光素酶报告基因筛选骨痹方.将软骨细胞随机分为空白组、模型组、阳性药组、骨痹方组.除空白组外,其余组均以羰基-氰-对-三氟甲氧基苯腙(FCCP)诱导.CCK-8法检测软骨细胞增殖情况.RT-qPCR法检测PINK1、Parkin、微管相关蛋白1轻链3(LC3)、B细胞淋巴瘤-2(Bcl-2)、大分子B淋巴细胞瘤(Bcl-xL)、髓细胞白血病1(Mcl-1)基因表达量.将60只小鼠随机分为假手术组、模型组、阳性药组、骨痹方组,每组15只,采用改良Hulth法建立小鼠膝骨关节炎模型,造模成功后番红O固绿染色观察软骨组织.Western Blot检测PINK1、Parkin、LC3、Bcl-2、Bcl-xL、Mcl-1蛋白表达量.结果 与空白组比较,模型组软骨细胞PINK1、LC3 mRNA表达增加,OD值及Parkin、Bcl-2、Bcl-xL、Mcl-1 mRNA表达降低(P＜0.05);与模型组比较,阳性药组和骨痹方组软骨细胞PINK1、LC3 mRNA表达减少,OD值及Parkin、Bcl-2、Bcl-xL、Mcl-1 mRNA表达增加(P＜0.05).与阳性药组比较,骨痹方组软骨细胞PINK1、LC3 mRNA表达降低,Parkin、Bcl-2、Bcl-xL、Mcl-1 mRNA表达升高(P＜0.05).与假手术组比较,模型组软骨组织中PINK1、LC3 Ⅱ/LC3 Ⅰ蛋白表达增加,而Parkin、Bcl-2、Bcl-xL、Mcl-1蛋白表达减少(P＜0.05);与模型组比较,阳性药组、骨痹方组PINK1、LC3Ⅱ/LC3Ⅰ蛋白表达降低,而Parkin、Bcl-2、Bcl-xL、Mcl-1蛋白表达升高(P＜0.05);与阳性药组比较,骨痹方组PINK1、LC3Ⅱ/LC3 Ⅰ蛋白表达降低,而Parkin、Bcl-2、Bcl-xL、Mcl-1蛋白含量升高(P＜0.05).结论 骨痹方可延缓软骨退变,其机制可能与抑制PINK1、LC3过度表达,激活Parkin,同时促进BCL2家族抗凋亡蛋白Bcl-xL、Mcl-1表达增加,阻止PINK1/Parkin复合物过度合成,有效降低过度的线粒体自噬有关.

关键词：膝骨关节炎、骨痹方、线粒体自噬、PINK1/Parkin、细胞凋亡

所属期刊栏目：26

分类号：R285.5(中药学)

资助基金：江苏省科技计划专项资金重点研发计划社会发展项目;江苏高校优势学科建设工程资助项目

在线出版日期：2024-09-18（万方平台首次上网日期，不代表论文的发表时间）

页数：共6页

页码：13-18