LncRNA-MIAT通过抑制miR-519d-3p激活EZH2促进甲状腺癌的恶性行为

摘要：

目的:探讨长链非编码RNA MIAT(LncRNA-MIAT)对甲状腺癌细胞增殖、凋亡、迁移和侵袭的调控作用与分子机制.方法:用癌症基因组图谱(TCGA)和甲状腺癌(THCA)mRNA-seq 数据分析LncRNA-MIAT和组蛋白甲基化转移酶 2(EZH2)在甲状腺癌中的表达.用人正常甲状腺细胞系Nt-hy-ori 3-1 和人甲状腺癌细胞系 FTC-133 作为靶细胞.qPCR 法检测 LncRNA-MIAT、miR-519d-3p、EZH2 mRNA的表达水平差异.RNA荧光原位杂交(FISH)检测 LncRNA-MIAT 在 FTC-133 细胞中的定位,Western blot检测EZH2 蛋白的表达.荧光素酶报告基因检测LncRNA-MIAT和miR-519d-3p 以及miR-519d-3p与EZH2 的直接作用.将FTC-133 细胞分为6 组[空白对照组(control组)、空载体组(Empty vector组)、过表达 LncRNA-MIAT 组(LncRNA-MIAT 组)、miR-519d-3p 的抑制剂组(miR-519d-3p inhibitor组)、EZH2 的抑制剂EPZ-6438 处理组(EPZ-6438 组)、miR-519d-3p 抑制剂联合过表达LncRNA-MIAT组(LncRNA-MIAT+miR-519d-3p inhibitor 组)].用 Edu 试剂盒和平板克隆法检测细胞增殖.用流式细胞术检测细胞凋亡.用Transwell细胞迁移和侵袭实验检测细胞的行为.结果:LncRNA-MIAT和 EZH2 在甲状腺癌组织和细胞中的表达均上调,二者具有正相关性(r=0.466,P<0.05),miR-519d-3p在FTC-133 细胞中表达下调(P<0.05).经过双荧光素酶报告基因实验检测发现miR-519d-3p的靶基因是EZH2,且LncRNA-MIAT靶向抑制miR-519d-3p激活EZH2.与Empty vec-tor组相比,LncRNA-MIAT组和miR-519d-3p inhibitor组的Edu 阳性细胞百分比、细胞克隆数、细胞侵袭和迁移数均显著上调(P<0.05),细胞凋亡率均减少(P<0.05).EZH2 的抑制剂 EPZ-6438 则减少Edu阳性细胞百分比、细胞克隆数、细胞侵袭和迁移数(P<0.05),增加细胞凋亡率(P<0.05).分别与LncRNA-MIAT组或miR-519d-3p inhibitor组比,LncRNA-MIAT+miR-519d-3p inhibitor组的Edu阳性细胞百分比、细胞克隆数、细胞侵袭和迁移数均显著上调(P<0.05),细胞凋亡率降低(P<0.05).结论:甲状腺癌细胞中LncRNA-MIAT通过抑制miR-519d-3p激活EZH2 促进甲状腺癌的恶性行为.

关键词：甲状腺癌、长链非编码RNAMIAT、miR-519d-3p、组蛋白甲基化转移酶2、细胞恶性行为

所属期刊栏目：29

分类号：R735.3+5;R392.11;Q78

资助基金：新疆维吾尔自治区自然科学基金2021D01C325

在线出版日期：2023-09-07（万方平台首次上网日期，不代表论文的发表时间）

页数：共8页

页码：1233-1240