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10.3969/j.issn.1000-1573.2010.04.015

利用组成型表达载体pMG36e电转化乳酸乳球菌ML23的研究

引用
为了探明乳酸菌电转化的最适条件,提高电转化效率,本试验以大肠杆菌-乳酸菌穿梭型质粒pMG36e为载体,以乳酸乳球菌ML23为受体,利用电转化方法研究了受体菌株的生长状态与细胞壁处理方式、质粒浓度、电场强度、复苏培养基组成与复苏培养时间、受体菌株的限制修饰作用对电转化效率的影响.结果表明:含2%甘氨酸和0.5 mol/L蔗糖的MRS培养基培养至对数生长中期的细胞,在电场强度11.0 kV/cm、电阻200 Ω、电容25 μF下电击转化,转化后细胞在SMRS培养基中培养2 h, 获得了较高的电转化效率.采用受体菌株修饰的质粒进行电转化,转化效率又提高了15倍以上,达1.05×105 CFU/μg DNA.

乳酸乳球菌ML23、组成型表达载体、质粒pMG36e、电转化、电转化效率

33

Q785(基因工程(遗传工程))

国家高技术研究发展计划863计划项目2006AA10Z317

2010-09-14(万方平台首次上网日期,不代表论文的发表时间)

共6页

71-76

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河北农业大学学报

1000-1573

13-1076/S

33

2010,33(4)

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