蓖麻类钙调蛋白基因RcCML42克隆与表达载体构建
为了探究类钙调蛋白基因家族成员在蓖麻体内的作用及表达模式,在蓖麻体内挖掘家族基因CML42,并对其进行克隆与表达分析.以哲蓖三号植株为试验材料,克隆获得RcCML42完整编码区序列(CDS),利用生物信息学方法对RcCML42基因序列进行分析,包括编码氨基酸、蛋白分子量及等电点、跨膜结构域、氨基酸序列一致性等内容.通过荧光定量PCR(qRT-PCR)技术,检测RcCML42基因在蓖麻植株根、茎、叶位置不同时间点的特异性表达情况.结果显示,RcCML42 CDS长度为597 bp,编码198个氨基酸,含有3个EF-hand钙结合结构域.蛋白分子量为22.27 ku,等电点为4.55,不存在跨膜结构域.氨基酸序列一致性分析表明,RcCML42与巴西橡胶树一致性最高,达86.84%.qRT-PCR结果显示,RcCML42基因在蓖麻根、茎、叶组织中均有表达,在经NaCl处理后,RcCML42在根中的表达量呈现先下降后上升的趋势.RcCML42在茎中12 h高度表达,在叶中为8 h高度表达.且在茎中的表达量显著高于其在根、叶中的表达.CML是植物体内最重要的一类钙感受器,通过与钙调素结合蛋白结合进而对植物细胞进行调控.当植物受到环境中NaCl侵害时,CML可以参加体内钙离子的调节,进而减轻盐胁迫对植物体的损害.综上,推测Rc-CML42在盐胁迫条件下的蓖麻信号转导中起重要作用.
蓖麻、类钙调蛋白、耐盐、钙离子、生物信息学
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S565.6(经济作物)
国家自然科学基金;国家自然科学基金;内蒙古自治区研究生科研创新资助项目;内蒙古自治区人才开发基金个人项目;内蒙古民族大学研究生科研创新资助项目;内蒙古民族大学研究生科研创新资助项目
2023-04-04(万方平台首次上网日期,不代表论文的发表时间)
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