猪链球菌纳米PCR检测方法的建立和应用

摘要：

为了建立一种高效、灵敏的猪链球菌(SS)检测方法,针对SS的谷氨酸脱氢酶基因(gdh)合成特异性引物,通过优化退火温度与引物浓度,经特异性、敏感性、重复性以及临床样品检测,建立了SS的纳米PCR检测方法.特异性试验结果显示,该方法仅能从SS的基因组序列中扩增得到687 bp的特异性序列,与猪胸膜肺炎放线杆菌、副猪嗜血杆菌、猪大肠杆菌、沙门氏菌、葡萄球菌无交叉反应,且能同时识别1、2、7和9型4个目前流行的SS主要血清型,满足临床上多血清型SS感染检测的需要;敏感性试验结果显示,该方法对SS的最低检测下限为10 cfu/mL,与普通PCR方法相比,灵敏度提高了100倍;重复性试验表明,该方法检测效果稳定,重复性较好.用该方法和普通PCR对临床上收集的44份疑似SS感染样品进行检测,阳性率分别为72.7％(32/44),54.5％(24/44),表明该纳米PCR方法具有灵敏度高,特异性好等优点.综上,本研究建立的SS纳米PCR检测方法,能够准确、高效检测SS,为猪链球菌病的临床诊断和流行病学调查提供了技术支持.

关键词：猪链球菌;谷氨酸脱氢酶基因;纳米PCR;临床诊断

所属期刊栏目：36

分类号：S855.1(动物医学（兽医学）)

资助基金：国家"十三五"重点计划专项课题;科技创新战略专项资金高水平农科院建设;广州市科技计划项目

在线出版日期：2021-09-13（万方平台首次上网日期，不代表论文的发表时间）

页数：共6页

页码：212-217