拟南芥转录因子MYB54的体外纯化及功能初探

摘要：

为了对MYB54基因的功能进行初步探究,对MYB54的进化保守性,蛋白质的二、三级结构,空间组织的特异性表达,高温胁迫响应,体外蛋白纯化和Western Blot检测以及转录激活活性进行了研究.结果表明,拟南芥中的MYB54与十字花科中的芥蓝、白菜、亚麻荠等同源性比较接近,分别达到了87％,87％,81％;与禾本科植物高粱、谷子和水稻的同源性较低,分别为54％,57％,47％;与小麦和番茄的同源性为42％.小麦中MYB54与拟南芥中MYB54在保守结构域,亲水性,二、三级结构都十分相似.RT-PCR结果表明,拟南芥中MYB54基因在果荚中表达量最高,暗示MYB54可能在生殖发育过程中发挥了一定的作用,并且拟南芥MYB54和小麦中的MYB54在高温胁迫下的表达量都显著降低,表明该基因在响应热胁迫中也发挥了重要功能.拟南芥中MYB54在18,30,37℃条件下,均可被成功诱导,在37℃条件下诱导纯化的蛋白量最高,Western Blot结果检测MYB54蛋白可以被正确翻译表达.利用酵母GAL4系统对MYB54的转录激活活性进行探究,发现MYB54在不与转录激活结构域结合的情况下,依然可以激活下游报告基因的表达,表明MYB54确实具有转录激活活性.初步对MYB54蛋白进行了结构、组织表达、蛋白诱导纯化、转录活性以及逆境表达分析,为MYB54在拟南芥及小麦生长发育过程中的功能研究提供一定的理论基础.

关键词：拟南芥;MYB54;组织表达;诱导纯化;转录激活;逆境胁迫

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分类号：Q943.2(植物学)

资助基金：中国科学院农业资源重点实验室与河北省节水农业重点实验室重点方向培育项目ZZKT201601

在线出版日期：2021-09-13（万方平台首次上网日期，不代表论文的发表时间）

页数：共9页

页码：47-55