小桐子磷酸葡萄糖变位酶cPGM与pPGM基因的克隆及原核表达分析

摘要：

为了探究磷酸葡萄糖变位酶(PGM)在植物蔗糖与淀粉代谢中的重要作用,基于同源序列比对的方法,在小桐子基因组中鉴定到1个细胞质型PGM基因(命名为JccPGM)与1个叶绿体型PGM基因(命名为JcpPGM),利用qRT-PCR方法检测JccPGM与JcpPGM基因在小桐子不同器官与低温条件下的表达特性,同时,构建了pGEX-4T-1-JccPGM与pGEX-4T-1-JcpPGM原核表达载体并在大肠杆菌BL21(DE3)中进行了表达分析.结果表明:两者分别编码582,637 aa的蛋白质.聚类分析表明,小桐子pPGM在其N端包含叶绿体定位信号肽,而cPGM较pPGM多4段肽链序列-108 VGVDGS113-、-183 SGPE186-、-283 GKSNSE288-、-470 SLGEVN475-.qRT-PCR表达分析显示,小桐子cPGM与pPGM基因都在叶片中高表达,而在根与种子中表达量较低.通过BL21(DE3)诱导表达,分别得到90.7,97.0 ku的蛋白条带,与理论融合蛋白的分子量一致.综上所述,本研究为开展小桐子cPGM与pPGM基因表达蛋白的功能分析以及其在蔗糖与淀粉积累、逆境应答中的机制研究奠定了基础.

关键词：小桐子;磷酸葡萄糖变位酶;基因克隆;原核表达

所属期刊栏目：36

分类号：Q78;S759.03(基因工程（遗传工程）)

资助基金：云南省地方本科高校部分基础研究联合专项;云南省大学生创新创业训练计划项目;国家自然科学基金;国家级大学生创新创业训练计划项目

在线出版日期：2021-09-13（万方平台首次上网日期，不代表论文的发表时间）

页数：共8页

页码：23-30