山羊CPT1A基因的克隆表达及肌内脂肪含量的相关性分析

摘要：

旨在获得山羊肉毒碱棕榈酰基转移酶Ⅰ肝脏亚型CPT1A(Carnitine palmitoyltransferase 1A,CPT1A)基因序列,分析其生物学特征,阐明其组织及细胞分化时序表达规律,同时揭示CPT1A基因在背最长肌、股二头肌、臂三头肌中与肌内脂肪含量(IMF)的关系.选取7只1周岁健康简州大耳羊为试验动物,屠宰后迅速采集心、肝、脾、肺、肾、背最长肌、股二头肌、臂三头肌、皮下脂肪和腹间脂肪组织样品,利用TRIzol法提取总RNA.采用RT-PCR法克隆山羊CPT1A基因,进行生物信息学分析.利用实时荧光定量PCR技术检测CPT1A基因在不同组织中的表达水平以及CPT1A在山羊前体脂肪细胞分化过程中的时序表达.使用皮尔逊相关系数进行CPT1A基因表达量与IMF含量相关性分析.通过克隆得到CPT1A基因序列(MH345735)为2380 bp,包含CDS全长2319 bp,5′UTR 38 bp和3′UTR 23 bp,编码773个氨基酸.组织表达结果显示,CPT1A在简州大耳羊肝脏和肾脏中的表达水平极显著高于其他组织(P<0.01).细胞时序表达定量结果显示,CPT1A在诱导分化0～5 d逐渐升高,在第5天表达量最高(P<0.01),5～9 d逐渐下降.CPTA基因表达量与IMF含量相关性分析结果显示,CPT1A基因表达量与各肌肉组织肌内脂肪含量均显著正相关.结果表明,CPT1A可能在肌内脂肪沉积过程中具有重要调控作用,为进一步研究CPT1A调控山羊脂质代谢的机理研究提供参考.

关键词：山羊、CPT1A基因、克隆、组织表达、肌内脂肪

所属期刊栏目：34

分类号：Q78;S826(基因工程（遗传工程）)

资助基金：国家自然科学基金面上项目31601921,31672395;国家重点研发计划课题2018YFD0502002;四川省科技支撑计划"十三五育种攻关"项目2016NYZ0045;西南民族大学研究生创新型科研项目CX2018SZ48

在线出版日期：2019-12-03（万方平台首次上网日期，不代表论文的发表时间）

页数：共8页

页码：231-238