家蚕抗菌肽基因的克隆及重组蛋白的自诱导表达

摘要：

抗菌肽是生物体内具有抗菌活性的一种小分子物质,在昆虫细胞抵御外源微生物的感染过程中发挥着重要作用.为研究家蚕抗菌肽基因克隆、重组抗菌肽的表达和纯化方法,以家蚕中肠组织总RNA为模板,设计4对特异性引物,应用RT-PCR技术扩增BmCecropin、BmCecropinB6、BmCecropinD和Bmmoricin这4种抗菌肽基因,通过自诱导方式原核表达4种抗菌肽重组蛋白,并对4种抗菌肽重组蛋白进行Ni-NTA亲和层析和超滤纯化.结果表明,克隆的BmCecropin、BmCecropinB6、BmCecropinD和Bmmoricin 这4种抗菌肽的基因大小分别为198,108,105,129 bp,通过自诱导方式表达的BmCecropin、BmCecropinB6、BmCecropinD和Bmmoricin这4种抗菌肽重组蛋白,经SDS-PAGE电泳检测,大小分别为24,21,20,22 ku,经Ni-NTA亲和层析和超滤纯化后的4种抗菌肽重组蛋白条带单一.结果可为4种抗菌肽重组蛋白后续的抑菌试验和在抑菌剂、化妆品和防腐剂等方面的进一步应用奠定基础.

关键词：家蚕、抗菌肽、重组蛋白、自诱导表达、纯化

所属期刊栏目：33

分类号：Q78(基因工程（遗传工程）)

资助基金：云南省大学生创新创业训练计划项目DCXM163018;红河学院应用型科学研究项目XJY15Z07;红河学院博士专项XJ15B13;云南省昆虫生物医药研发重点实验室开放课题

在线出版日期：2018-04-08（万方平台首次上网日期，不代表论文的发表时间）

页数：共6页

页码：33-38