苹果树腐烂病菌β-葡萄糖苷酶基因的克隆及表达分析
为探究苹果树腐烂病菌β-葡萄糖苷酶基因VmGluI的序列特征及其在病菌侵染致病过程中的表达,以强致病力菌株LXS080601为材料,利用RT-PCR技术克隆基因cDNA序列,通过生物信息学软件对VmGluI编码蛋白的系统进化关系、理化性质和二级结构进行分析,采用实时荧光定量PCR技术测定VmGluI的表达量.结果显示,苹果树腐烂病菌VmGluI的开放阅读框为1689 bp(GenBank登录号KY646110),编码562个氨基酸,蛋白分子量62.7 kDa.VmGluI编码的蛋白具有糖基水解酶1家族的保守功能域,其二级结构主要以α-螺旋和无规则卷曲为主,β-转角较少.VmGluI编码氨基酸序列与苹果和梨树腐烂病菌β-葡萄糖苷酶基因(KUI68239.1和KUI56905.1)同源性最高,分别为98.7％和87.8％,而与非植物病原真菌β-葡萄糖苷酶基因亲缘关系较远.接种苹果树腐烂病菌的富士枝条中,VmGluI显著上调表达,推测其在腐烂病菌侵染致病过程中起重要作用.离体枝条接种48 h后基因表达量开始显著升高,72 h时表达量最高为对照6.3倍;活体枝条接种12 h后,基因表达量已为对照的11.2倍,接种后48 h基因表达出现低谷,但96 h时表达量为对照的16.8倍,表明苹果树腐烂病菌在侵染离体和活体枝条过程中,VmGluI表达水平和时序变化存在明显差异.
苹果树腐烂病菌、β-葡萄糖苷酶基因、基因克隆、生物信息学分析、基因表达
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Q78;S436.03(基因工程（遗传工程）)
国家自然科学基金项目31272001,31371883;现代农业产业技术体系建设专项资金CARS-28;国家农业行业公益性项目201203034-02;山东省"泰山学者"建设工程专项
2018-01-22（万方平台首次上网日期，不代表论文的发表时间）
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