萼脊兰MADS-box基因的克隆及表达载体构建

摘要：

为了研究"ABC"模型的B类PI基因,探究决定花瓣和雄蕊形成的基因特征.采用CTAB法提取萼脊兰花瓣总RNA,并通过RT-PCR法克隆萼脊兰PI基因的编码序列,该序列长度为633 bp,编码210个氨基酸,与小兰屿蝴蝶兰的氨基酸相似性最高.对PI所表达蛋白质的结构、亲水性和二级结构进行了分析,结果显示,该基因包含MADS-box和K-box保守结构域,属于MADS-box基因家族;该蛋白分子属于亲水性蛋白,包含56.19% α螺旋、13.81% 的延伸链以及30%的不规则折叠,实时荧光定量PCR结果显示,PI基因主要在花器官中表达,且表达量高,说明PI基因的表达具有组织特异性.构建植物表达载体的结果显示,目的基因和带启动子的片段已插入到表达载体pCAMBIA1301中,表明成功构建植物表达载体1301-PI,为最终获得新奇花型的萼脊兰奠定基础.

关键词：萼脊兰、PI基因、克隆、表达分析、表达载体

所属期刊栏目：32

分类号：Q949.71+8.43;Q78(植物学)

资助基金：郑州市科技发展计划项目20150448;郑州市重大科技专项141PZDZX038;河南省教育厅重点科研项目14B180036

在线出版日期：2017-08-02（万方平台首次上网日期，不代表论文的发表时间）

页数：共5页

页码：65-69