马铃薯A病毒重组CP多克隆抗体的制备及其在DAS-ELISA检测中的应用

摘要：

利用重组CP作抗原制备出马铃薯A病毒的多克隆抗体,并将其用于DAS-ELISA检测.以pET22b(+)为起始载体,构建了PVA-CP基因的原核表达载体pET22b-ACP,重组菌BL21(pET22b-ACP)经IPTG诱导表达出了分子量为30 kDa的特异性重组CP.利用高纯度重组CP为抗原免疫家兔,制备出了效价为1:512 k的抗血清.以PVA重组CP为抗原,用间接ELISA与直接ELISA分别测定重组CP纯化抗体(IgG)及其碱性磷酸酶标记物(IgG-AP)的活性,用DAS-ELISA测定2种抗体的活性,目测及OD值测定结果表明3种ELISA测定反应都呈阳性.以PVA病毒阳性标准物为抗原,在上述3种ELISA测定中也呈阳性反应,重组CP多克隆抗体及其酶标抗体与PVA有较强的反应信号.利用重组CP制备的多克隆抗体及其酶标抗体达到了马铃薯A病毒DAS-ELISA检测的要求.

关键词：马铃薯A病毒、重组CP、多克隆抗体、酶标记抗体、DAS-ELISA检测

所属期刊栏目：32

分类号：S432.4+1;Q782;S532(病虫害及其防治)

资助基金：山东省农业产业体系薯类创新团队遗传育种岗位基金项目SDAIT-10-022-03;济南市国际科技合作计划项目2014003054

在线出版日期：2017-05-26（万方平台首次上网日期，不代表论文的发表时间）

页数：共6页

页码：41-46