蓖麻标雌/单雌/两性系花序 MSAP反应体系的建立
为了建立 Lm 型雌性系蓖麻不同发育时期的标雌/单雌/两性系花序 MSAP 反应体系,提取不同类型不同发育时期的花序基因组 DNA,混合成基因池;用 EcoR Ⅰ和 Hpa Ⅱ/Msp Ⅰ的组合,12 h 可将 DNA 酶切完全;16℃条件下,将酶切产物与 EcoR Ⅰ、Hpa Ⅱ/Msp Ⅰ接头过夜连接;连接产物用于预扩增。优化后的预扩增反应体系为10×PCR Buffer 2.5μL、dNTPs (10 mmol /L)2.5μL、Mg2+(25 mmol /L)2.0μL、模板2.0μL、E 0扩增引物(10 pmol /μL)1.5μL、H0扩增引物(10 pmol /μL)1.5μL、LA Taq(5 U /μL)0.25μL、ddH2 O 12.75μL。预扩增产物稀释10倍后用于选择性扩增。优化后的选择性扩增体系为10×PCR Buffer 2.5μL 、dNTPs (10 mmol /L)2.0μL、Mg2+(25 mmol /L)4.0μL、模板3.0μL、E X 扩增引物(10 pmol /μL)1.0μL、H /MX 扩增引物(10 pmol /μL)1.0μL、LA Taq(5 U /μL)0.30μL、ddH2 O 11.2μL。
蓖麻、花序、MSAP
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S563.03(经济作物)
国家自然科学基金项目30760123;31160290;31460353;国家农业部公益性行业专项201003057;内蒙古自治区高等学校“青年科技英才支持计划”NJYT-14-A10;内蒙古自治区科技创新引导项目;内蒙古自治区“草原英才”计划项目;市校合作项目SXZD2012018;SXZD2012017;SXZD2012006;内蒙古自治区高校蓖麻产业工程技术研究中心开放基金项目BMYJ2011009
2016-08-01(万方平台首次上网日期,不代表论文的发表时间)
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