芍药查尔酮异构酶基因(CHI)克隆、密码子偏好性分析以及蛋白结构功能预测
为了丰富芍药 CHI 基因研究的基础数据,首先利用 RACE 技术对芍药 CHI 基因的 CDS 区进行克隆,并通过EMBOSS 软件分析序列的密码子偏好性,其次利用生物信息学软件和在线数据库对芍药 CHI 进行蛋白结构与功能预测。结果表明,克隆获得芍药 CHI 基因 cDNA 序列长度为898 bp(GenBank 序列号:JN119872),芍药 CHI 基因偏好使用以 A /U 结尾的密码子,28种偏好密码子(RSCU >1),其中偏好性较强的有 UUG、UGU、CAU、AGA、AGG、CGG(RSCU≥2),在密码子的使用频率上,芍药 CHI 基因与酵母、大肠杆菌等模式生物基因组的差异均大于拟南芥基因组。芍药 CHI为非跨膜亲水的稳定蛋白,无信号肽,属于非分泌蛋白;主要分布在细胞质(45.0%)和微体(42.5%)中;无糖基化位点,14个磷酸化位点,其中第20位氨基酸处存在一个典型的磷酸激酶 PKC,含有1个异构酶 Chalcone 保守结构域;二级结构包括α螺旋(39%)、延伸链(20%)、β-转角结构(13%)和无规则卷曲(27%);三级结构呈β-三明治折叠形成的倒置花束。发现了一个异构酶催化活性区域和一个重要的特异性蛋白质激酶 PKC 位点,为今后深入研究 CHI 基因功能提供有利的基础资料,此外,拟南芥真核表达更适合作为芍药 CHI 基因的外源表达系统。
芍药、CHI 基因、密码子偏好性、蛋白结构与功能
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Q78;S682.03(基因工程(遗传工程))
国家自然科学基金项目31372097;江苏省农业科技自主创新资金项目CX122019
2016-06-13(万方平台首次上网日期,不代表论文的发表时间)
共10页
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