克隆山羊成纤维细胞系的建立与生物学特性的研究

摘要：

为研究克隆黄淮白山羊耳部皮肤成纤维细胞(cGSF)的体外培养及其生物学特性.通过组织块接种培养法和胰蛋白酶消化法均可以获得原代cGSF,但在接种培养24 h后,组织块法收获的细胞贴壁率和细胞量要明显高于胰酶消化法.就生长特征而言,cGSF的生长曲线也呈现典型“S”型,到达指数增长期、平台期的时间分别为第3,6天,早于普通黄淮白山羊的皮肤成纤维细胞(GSF),后者分别为第4,8天.cGSF原代(P0)、第2代(P2)、第8代(P8)细胞的染色体数目异常率均高于相同代数的GSF.在相同转染条件下,cGSF在转染pEGFP-N1后,再经G418筛选亦可形成克隆点,扩增获得阳性细胞系.总之,源自克隆山羊的体细胞体外生长、转基因后的生物学特征有别于普通动物分离得到的细胞系.因此,利用来自克隆动物的体细胞开展研究,选择分离培养、纯化、转基因方法时需要适当调整.

关键词：体细胞克隆、山羊、成纤维细胞、生物学特性

所属期刊栏目：30

分类号：Q78;S826(基因工程（遗传工程）)

资助基金：国家“863”计划子课题2011AA100307-04;国家科技重大专项2014ZX08008-005

在线出版日期：2015-12-18（万方平台首次上网日期，不代表论文的发表时间）

页数：共6页

页码：77-82