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10.7668/hbnxb.2015.05.011

RHDV VLPs单克隆抗体的制备及其识别表位的初步定位

引用
为了筛选兔出血症病毒(RHDV)衣壳蛋白(vP60)的特异性单抗,并进一步分析单抗识别表位的分布情况,将重组杆状病毒rAcV-Bac-VP60接种Sf9昆虫细胞,收获细胞培养物,电镜观察显示重组VP60蛋白获得有效表达,并可组装成病毒样粒子(VLPs).将RHDV VLPs作为免疫原与等量弗氏佐剂乳化,免疫BALB/c小鼠,取脾细胞与SP2/0骨髓瘤细胞融合,经3次亚克隆后,获得11株能稳定分泌抗RHDV VLPs抗体的阳性杂交瘤细胞株.间接ELISA、IFA和Western Blot鉴定结果表明,这11株单克隆抗体均能够特异地识别RHDV VLPs和天然RHDV.11株单抗均为IgG1,其中1D4和3F7的轻链为Lambda型,其余均为Kappa型.截短表达结果显示,单抗5A3针对RHDV VP60的NTA区,5F3针对RHDV VP60的S区,单抗1B8、1 D4、3D11、3F7、4C2、4G2、5G2、5H3和6B2针对RHDV VP60的P区.研究为RHDV VLPs抗原表位的鉴定和RHDV结构功能的研究奠定了基础,同时为RHDV的检测和新型疫苗研究提供物质基础.

RHDV VLPs、单克隆抗体、表位、初步定位

30

S858.2912.65(动物医学(兽医学))

江苏省自然科学基金项目BK20140740;江苏省农业科技自主创新资金项目CX135029;现代农业产业技术体系建设专项资金项目CARS-4

2015-12-18(万方平台首次上网日期,不代表论文的发表时间)

共6页

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华北农学报

1000-7091

13-1101/S

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2015,30(5)

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