生防荧光假单胞菌2 P24中EnvZ/OmpR双因子系统克隆与OmpR原核表达

摘要：

用Mini-Tn5转座子随机突变荧光假单胞菌野生型菌株2P24,得到抗生素2,4二乙酰基间苯三酚(2,4-di-acetylphloroglucinol,2,4-DAPG)产量提高的突变体Sesu-25。对转座子侧翼序列分析表明,转座子插入到EnvZ/OmpR双因子系统的反应调节因子ompR基因。克隆得到包含完整EnvZ/OmpR系统,全长约为5.9 kb的DNA片段。该双因子系统中的envZ基因和ompR基因与P. fluorescens F113的envZ基因和ompR基因同源性分别为93%和96%。将ompR基因克隆到表达载体pET-22b(+)中,得到重组表达载体pET-ompR。将pET-ompR转入Escherichia coli BL21中得到重组菌株BL21-ompR,用IPTG诱导表达和亲和柱层析法纯化的OmpR蛋白,经SDS-PAGE电泳分析表明ompR基因得到成功表达和纯化。

关键词：荧光假单胞菌、随机突变、EnvZ/OmpR、双因子系统

分类号：Q785(基因工程（遗传工程）)

资助基金：天津市自然科学基金重点项目12JCZDJC23100;国家高技术研究发展计划项目2011AA10A205;天津市农科院院长基金项目11004,13011

在线出版日期：2014-07-23（万方平台首次上网日期，不代表论文的发表时间）

页数：共5页

页码：41-45