应用农杆菌介导的生长点转化方法建立甜瓜遗传转化技术

摘要：

为探讨甜瓜的遗传转化技术,以甜瓜品种河套蜜瓜腋芽生长点做外植体,利用庆大霉素基因作为筛选基因,对影响农杆菌转化的菌液浓度、转化时间、共培养时间进行了正交试验。通过优化转化条件,建立了农杆菌介导的甜瓜腋芽生长点遗传转化体系。结果表明,采用培养20 d的无菌苗,以腋芽作为外植体,预培养1 d；用OD600=0.7的菌液转化10 min后,黑暗中共培养2 d,然后用40 mg/L庆大霉素进行筛选；移栽后在叶片上喷洒20 mg/L庆大霉素筛选转基因植株,效果最好。通过对庆大霉素抗性苗进行PCR检测,初步验证外源基因已经整合进甜瓜基因组,转化率达到76%,幼苗移栽成活率为76.3%。

关键词：甜瓜、植物生长点、遗传转化、农杆菌

分类号：S652(瓜果园艺)

资助基金：国家自然科学基金资助项目31101559,31360486;教育部“春晖计划”科研合作项目Z2005-2-01003

在线出版日期：2014-06-07（万方平台首次上网日期，不代表论文的发表时间）

页数：共5页

页码：116-120