油菜黑胫病菌 ISSR-PCR 反应体系优化

摘要：

通过正交试验设计，对油菜黑胫病菌ISSR-PCR 反应体系的各影响因素进行研究，即从 Taq 酶、Mg2＋、dNTPs、引物以及模板浓度5因素4水平进行优化，筛选并建立了适合油菜黑胫病菌ISSR分子标记的最佳反应体系，即在25μL反应体系中包含Taq DNA酶1 U，Mg2＋2．0 mmol/L，dNTPs 0．2 mmol/L，引物0．6μmol/L，模板40 ng以及2．5μL 10×Buffer。并以扩增条带丰富、清晰、稳定性强为原则，从所查找的110条引物中筛选出24条适于油菜黑胫病菌ISSR-PCR扩增的引物，同时对各引物的最佳退火温度进行了筛选确定，经对20株病原菌的稳定性检测，证实该优化体系可用于研究该病原菌的遗传多样性。

关键词：油菜黑胫病原菌、ISSR-PCR、体系优化

分类号：S435.654(病虫害及其防治)

资助基金：国家科技支撑项目2010BAD01B04；内蒙古创新基金项目NMGCX201203；内蒙古科技创新平台建设NMGKJHZ2012001

在线出版日期：2013-09-23（万方平台首次上网日期，不代表论文的发表时间）

页数：共4页

页码：204-207