小麦 TaNADP-ME1基因在大肠杆菌中的融合表达及可溶蛋白纯化

摘要：

　　NADP依赖的苹果酸酶（NADP-ME）是C4光合途径关键酶。为了确定TaNADP-ME1基因的功能，利用重组技术将前期克隆到的TaNADP-ME1基因构建到原核表达载体pET32a，双酶切和PCR鉴定阳性克隆，CaCl2法转化大肠杆菌BL21（DE3）pLysS，IPTG诱导融合蛋白表达，Ni 2＋-NTA琼脂糖亲和层析柱纯化融合蛋白。成功获得了重组原核表达载体pETE1，TaNADP-ME1基因在BL21（DE3）pLysS中得到了融合表达，SDS-PAGE表明，融合蛋白分子量为80 kDa，并成功纯化到融合蛋白。

关键词：小麦、TaNADP-ME1基因、融合表达、蛋白纯化

分类号：Q78(基因工程（遗传工程）)

资助基金：国家“973”项目2010CB951501；中国科学院知识创新重要方向性项目KSCX2-EW-N-02；KSCS2-EW-J-5；中国科学院“西部博士资助项目”XBBS200914；新疆维吾尔自治区自然基金会项目2011211B507

在线出版日期：2013-08-25（万方平台首次上网日期，不代表论文的发表时间）

页数：共5页

页码：1-5