10.3969/j.issn.1000-7091.2012.05.008
鹅黄病毒囊膜蛋白的原核表达及抗原性分析
选取鹅黄病毒囊膜蛋白(E蛋白)基因进行克隆、表达和纯化,以获得能应用于血清学诊断和可作为亚单位疫苗的重组蛋白.根据鹅黄病毒JS804株全基因序列设计了1对引物,采用RT-PCR方法扩增出了鹅黄病毒的E基因,将其克隆到表达载体pET32a(+)中,构建了重组表达质粒pET32a-E,转化大肠杆菌BL21(DE3),并用IPTG进行诱导表达.结果表明,鹅黄病毒E基因在大肠杆菌中获得高效表达,融合蛋白分子量约为70 kDa,主要以包涵体形式存在于菌体中.Western Blot和间接免疫荧光试验发现,重组E蛋白具有较好的反应原性和良好的免疫原性.鹅黄病毒E蛋白的原核表达为进一步研究该蛋白功能、建立血清学检测方法及研制亚单位疫苗奠定了基础.
禽黄病毒、E蛋白、原核表达、抗原性
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Q786;S855.3(基因工程(遗传工程))
江苏省农业科技自主创新资金项目cx114039;国家自然科学基金项目31172345
2013-01-18(万方平台首次上网日期,不代表论文的发表时间)
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