利用RNAi技术抑制马铃薯类受体激酶基因(StRLK)表达的研究

摘要：

植物类受体蛋白激酶( Receptor-like protein kinase,RLK)是蛋白激酶的一个亚家族,参与植物的信号转导,在植物生长发育、抗病等过程中起重要作用.在前期研究中自二倍体马铃薯高抗青枯病基因型ED13中获得了类受体蛋白激酶基因StRLK.利用StRLK基因的特异区段,以pUCCRNAi为中间克隆载体、pCHF1为植物表达载体,构建了该基因的RNA干扰载体pCHF1-StRLK.进一步以ED13的茎段为外植体,利用农杆菌介导法将pCHF1- StRLK导入ED13中,获得了5株再生植株.用CaMV35S启动子特异引物对5株再生植株进行PCR扩增,均得到大小约500 bp的特异性条带,初步证明pCHF1- StRLK成功转入ED13.以ED13为对照,利用StRLK基因的特异引物对这5株再生植株进行半定量RT-PCR分析,结果表明,该基因的表达在5个转基因植株中均受到了不同程度的抑制,说明导入的pCHF1- StRLK发挥了干扰活性,且干扰效果与基因的插入位点有关,为进一步研究StRLK基因的功能提供依据.

关键词：二倍体马铃薯、StRLK基因、遗传转化、RNA干扰

所属期刊栏目：27

分类号：Q78;S532.03(基因工程（遗传工程）)

资助基金：现代农业产业技术体系专项资金资助CARS-10-ES10;国家科技支撑项目2012BAD02B05;山东省自然科学基金项目Y2007D24,ZR2010CQ025;人力资源和社会保障部留学回国人员科技活动项目择优资助项目

在线出版日期：2012-11-30（万方平台首次上网日期，不代表论文的发表时间）

页数：共5页

页码：18-22