10.3969/j.issn.1000-7091.2012.04.004
利用RNAi技术抑制马铃薯类受体激酶基因(StRLK)表达的研究
植物类受体蛋白激酶( Receptor-like protein kinase,RLK)是蛋白激酶的一个亚家族,参与植物的信号转导,在植物生长发育、抗病等过程中起重要作用.在前期研究中自二倍体马铃薯高抗青枯病基因型ED13中获得了类受体蛋白激酶基因StRLK.利用StRLK基因的特异区段,以pUCCRNAi为中间克隆载体、pCHF1为植物表达载体,构建了该基因的RNA干扰载体pCHF1-StRLK.进一步以ED13的茎段为外植体,利用农杆菌介导法将pCHF1- StRLK导入ED13中,获得了5株再生植株.用CaMV35S启动子特异引物对5株再生植株进行PCR扩增,均得到大小约500 bp的特异性条带,初步证明pCHF1- StRLK成功转入ED13.以ED13为对照,利用StRLK基因的特异引物对这5株再生植株进行半定量RT-PCR分析,结果表明,该基因的表达在5个转基因植株中均受到了不同程度的抑制,说明导入的pCHF1- StRLK发挥了干扰活性,且干扰效果与基因的插入位点有关,为进一步研究StRLK基因的功能提供依据.
二倍体马铃薯、StRLK基因、遗传转化、RNA干扰
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Q78;S532.03(基因工程(遗传工程))
现代农业产业技术体系专项资金资助CARS-10-ES10;国家科技支撑项目2012BAD02B05;山东省自然科学基金项目Y2007D24,ZR2010CQ025;人力资源和社会保障部留学回国人员科技活动项目择优资助项目
2012-11-30(万方平台首次上网日期,不代表论文的发表时间)
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