苋菜AmPCS基因的克隆及表达载体构建

摘要：

合成植物络合素(PCs)是高等植物减轻重金属毒害的重要机制.通过对镉超积累苋菜品种天星米植物络合素合成酶基因(PCS)的克隆及表达载体构建,旨在为植物修复镉污染土壤奠定基础.依据同源克隆原理,通过RTPCR和RACE方法克隆苋菜PCS基因.序列分析表明:苋菜PCS基因eDNA全长1 770 bp,包含完整的阅读框,编码485个氨基酸；苋菜PCs合成酶与拟南芥、遏蓝菜、芥菜及油菜PCs合成酶相似性为91.96％ -95.67％,其氨基酸序列N端有1个Pfam:Phytochelatin结构域(功能为催化合成植物络合素)、C端有1个Pfam:Phytochelatin_C结构域(功能为重金属离子感应器).因此,推断苋菜PCS基因编码蛋白是PCS-like家族的新成员,具有催化合成植物络合素的功能,将它在GenBank注册,序列号为:JN979370,命名为ArnPCS.在AmPCS基因的编码区加入BamH Ⅰ和Sac Ⅰ酶切位点,双酶切植物表达载体pBI-121和带有酶切位点的PCR产物,成功获得苋菜PCS基因正义表达载体pBI-PCS.

关键词：苋菜、植物络合素、克隆、AmPCS基因、植物表达载体

所属期刊栏目：27

分类号：Q78(基因工程（遗传工程）)

资助基金：国家自然科学基金项目30800704;中央级公益性科研院所基本科研业务费专项资金2011-29

在线出版日期：2012-07-27（万方平台首次上网日期，不代表论文的发表时间）

页数：共6页

页码：44-49