动物源大肠杆菌O157:H7多重PCR检测方法的初步研究

摘要：

为建立快速、特异的分离鉴定大肠杆菌O157:H7的多重PCR方法,根据GenBank上已发表的大肠杆菌O157:H7菌体抗原和鞭毛抗原的基因序列(rfbE和fliC基因)设计2对特异引物,分别建立针对rfbE fliC基因的单一PCR方法；通过优化扩增条件,进一步建立可用于动物粪便检测的大肠杆菌多重PCR方法,并进行特异性和灵敏性试验,同时还初步应用到临床样品的检测中.结果表明:所建立的多重PCR方法能同时扩增出rfbE基因(327 bp)和fliC基因( 247 bp)的特异性片段,特异性结果显示其他非大肠杆菌O157:H7的扩增结果均为阴性,表明该方法有较高的特异性；灵敏度试验结果显示细菌纯培养物的检测灵敏度为102cfu/mL.通过试验初步建立了快速、灵敏、特异的检测大肠杆菌O157:H7的多重PCR方法,为从动物粪便中分离鉴定大肠杆菌O157:H7提供了一种简单、灵敏的试验方法,可用于临床动物携带大肠杆菌O157:H7的分子流行病学调查.

关键词：大肠杆菌O157、H7、多重PCR、rfbE基因、fliC基因

所属期刊栏目：26

分类号：S855.1(动物医学（兽医学）)

资助基金：河南省重大公益科研项目81100912300;国家科技支撑计划2007BAQ01047;漯河市科技计划项目081203

在线出版日期：2012-05-14（万方平台首次上网日期，不代表论文的发表时间）

页数：共5页

页码：87-91