野大麦HbCBL1和HbCBL2结构与亚细胞定位分析
利用RT-PCR从野大麦cDNA扩增出两个基因HbCBL1和HbCBL2.蛋白结构分析表明,其具有典型的EF手臂,且HbCBL1的N-端含有豆蔻酰化结构域.为了明确野大麦HbCBL1和HbCBL2结构对其在植物体内亚细胞水平分布的作用,分别构建了以35S为启动子驱动的与绿色荧光蛋白基因GFP融合的植物表达载体,通过基因枪介导法将重组载体转入洋葱上表皮细胞,同时通过醮花法获得拟南芥稳定转基因株系,利用激光共聚焦扫描显微镜检测融合蛋白的表达部位.瞬时表达结果表明,融合蛋白HbCBL2∷GFP在液泡膜上可见;HbCBL1∷GFP在质膜上可见,同时在核中也有信号;HbCBL1的N端豆蔻酰化位点参与了该基因的定位.稳定表达结果表明,HbCBL2主要定位于液泡膜上;HbCBL1主要定位于质膜和细胞核;同时这两个蛋白在保卫细胞中也有表达.研究表明,HbCBL1和HbCBL2的结构决定了其亚细胞水平的表达部位,为进一步分析其生物学功能奠定了基础.
野大麦、HbCBL1、HbCBL2、激光共聚焦扫描显微镜、亚细胞定位
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Q71(生物大分子的结构和功能)
国家重大转基因专项2009ZX08009-060B;国家自然科学基金项目30971850;北京自然科学基金项目5102017;北京市农林科学院科技项目2010A003
2012-01-18(万方平台首次上网日期,不代表论文的发表时间)
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