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大豆脂肪酸脱饱和酶反义基因转化根癌农杆菌研究

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根据NCBI中大豆fad2-1序列设计引物,用PCR方法从大豆的基因组DNA中扩增大豆脂肪酸脱饱和酶基因,克隆到pMD18-T vector中,转化大肠杆菌JM109菌株,进行测序与比对.然后,将其反向克隆到表达载体pBt,转化农杆菌菌株LBA4404,经双酶切鉴定和PCR扩增检测,获得具有该基因的农杆菌工程菌.结果表明,克隆的fad2-1基因为1 196 bp,基因序列与NCBI中已发表的fad2-1序列只有4%的差异,相似性大于95%,说明克隆的基因是大豆fad2-1基因;构建了该基因的反向表达载体,转入农杆菌内.这为利用农杆菌介导法把该反义基因转入大豆,改良脂肪酸成分奠定了基础.

大豆、脂肪酸脱饱和酶基因、反义技术、根癌农杆菌、转化

26

Q78(基因工程(遗传工程))

河南省教育厅自然科学基础研究项目2008A208018;国家"863"项目2006AA100104-15子课题

2011-08-16(万方平台首次上网日期,不代表论文的发表时间)

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华北农学报

1000-7091

13-1101/S

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2011,26(2)

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