基于农杆菌介导法的植物转基因载体的改造
根据植物转基因载体的特点和局限性,利用几种商业化载体进行克隆、酶切和重组,从而重构方便快捷的转基因植物表达载体.首先用PCR方法从pCAMBIA 1301质粒中扩增到含启动子CaM35S、完整GusA基因和终止子NOS三部分的片段,经TA克隆重组入pGM-T 载体中获得pGM-35S-GUS-NOS重组质粒.然后对来源于新疆沙冬青的抗寒基因AnGPAT片段和pGM-35S-GUS-NOS重组质粒进行双酶切,连接获得中间载体pGM-35S-GPAT-NOS.再对中间载体和双元真核表达载体pCAMBIA 2300双酶切后连接,转化入大肠杆菌和农杆菌.经PCR、酶切及测序鉴定后确认得到改造后的植物表达载体p2300-35S-GPAT-NOS.结果表明,这是一种简便、高效、通用、经济的载体重构策略.
转基因、表达载体、载体改造、新策略
26
Q78(基因工程（遗传工程）)
国家自然科学基金项目30900894,31070448;辽宁省教育厅科研计划项目L2010486
2011-05-19（万方平台首次上网日期，不代表论文的发表时间）
共6页
41-46
