南极菌Pseudoalteromonas sp.A211-5产碱性α-淀粉 酶Amy172的克隆表达及酶学性质研究

摘要：

对具有淀粉降解活性的南极菌Pseudoalteromonas sp.A211-5进行测序分析,根据基因注释结果,获得了一条基因序列为2139 bp的淀粉酶基因,命名为amy172;通过特异性引物克隆获得Amy172的基因序列并进行异源表达;采用Ni-NTA层析柱对重组α-淀粉酶Amy172进行纯化,采用DNS法测定其酶学性质,采用薄层层析(TLC)技术对其酶解产物进行分析.结果表明:SDS-PAGE显示在分子量为79 kDa左右有一条明显的目的蛋白条带;重组 α-淀粉酶Amy172最适温度为50℃,最适pH值为10.0,且在pH值5.0～10.0的范围内仍能保持80％以上的酶活,金属离子Fe3+、Mn2+、Mg2+、Fe2+、Ca2+、K+、Sr2+、Ni2+和Ba2+对酶活性具有抑制作用;TLC分析Amy172的酶解产物为葡萄糖、麦芽糖、麦芽三糖和麦芽四糖.

关键词：碱性α-淀粉酶、克隆表达、酶学性质

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分类号：TQ925.1(其他化学工业)

资助基金：海洋公益性行业科研专项201505026-4;山东省重点研发计划项目公益类专项2018GHY115013;青岛市产业培育计划科技惠民专项18-6-1-82-nsh

在线出版日期：2019-06-12（万方平台首次上网日期，不代表论文的发表时间）

页数：共7页

页码：36-42