重组头孢菌素C酰化酶的固定化研究

摘要：

将含头孢菌素C(CPC)酰化酶的重组大肠杆菌E.coli BL21 (DE3)/pET28-CPCAcy在50 L发酵罐中发酵,发酵液OD600可达19.5,酶活达到11 542 U·L-1;CPC酰化酶粗酶液经1％活性炭纯化后,比酶活由6.56 U· mg-1提高到10.77 U· mg-1;然后将纯化的CPC酰化酶共价结合固定在氨基载体LX-1000HA和环氧基载体LX-1000EPC上,并对固定化酶的热稳定性及pH值稳定性进行考察.结果表明,LX-1000HA固定化酶的初始酶活较LX-1000EPC固定化酶低,但其热稳定性、pH值稳定性以及酶与载体的结合强度均高于LX-1000EPC固定化酶;并且在固定化酶投加量相同时,LX-1000HA固定化酶的催化性能优于LX-1000EPC固定化酶.对LX-1000HA固定化酶进行催化批次实验,在催化39批次时达到半衰期.

关键词：重组、头孢菌素C酰化酶、固定化酶、稳定性、生物催化

所属期刊栏目：34

分类号：TQ465.1;Q556

资助基金：国家自然科学基金资助项目21276023,21476025;北京市自然科学基金资助项目2143041;中央高校基本科研业务费专项资金资助项目FRF-SD-12-007A

在线出版日期：2017-04-24（万方平台首次上网日期，不代表论文的发表时间）

页数：共6页

页码：19-24