粘红酵母ATP:柠檬酸裂解酶基因的克隆表达和酶学性质

摘要：

从粘红酵母(Rhodotorula glutinis)中克隆得到ATP:柠檬酸裂解酶基因两个亚基acl1和acl2,转化毕赤酵母(Pichia pastoris)GS115进行诱导表达,通过Ni柱纯化目的蛋白,以实时波长扫描对重组蛋白的酶学性质进行测定.SDS-PAGE分析表明,两个亚基ACL1和ACL2的分子量分别为66 kDa和55 kDa.重组蛋白的酶学测定表明,经毕赤酵母表达后,单个亚基酶活性不到1.0 U·mg-1,双亚基混合后具有较高的酶活性,当混合质量比为1∶1时全酶的酶比活力达到最大,为6.5 U· mg-1,酶反应的最佳条件为:pH值8.5、37℃反应10 min.为提高油料作物油脂含量提供了新的转基因材料.

关键词：粘红酵母、ATP:柠檬酸裂解酶、克隆、表达、酶比活、酶特性

所属期刊栏目：28

分类号：Q786(基因工程（遗传工程）)

资助基金：转基因生物新品种培育重大专项项目2009ZX08009-120B

在线出版日期：2011-12-14（万方平台首次上网日期，不代表论文的发表时间）

页数：共5页

页码：44-48