短小芽孢杆菌β-1,4-葡聚糖内切酶基因的克隆及在大肠杆菌中的分泌表达

摘要：

从一株产碱性纤维素酶的短小芽孢杆菌H12中克隆了编码β-1,4-葡聚糖内切酶的基因,对其基因序列及其酶的结构域进行了分析预测,同时将该酶的基因构建于大肠杆菌表达载体pET20b中,获得重组表达载体pET20b-EglA,将其转化至大肠杆菌BL21(DE3)菌株中进行表达.结果表明,该基因大小为1980 bp,共编码659个氨基酸;对β-1,4-葡聚糖内切酶结构域分析表明,该酶由两个不连续的结构域组成,其一为N-端催化结构域,由糖基水解酶家族9组成,其二为C-端底物结合结构域,由碳水化合物绑定结构域家族3组成;平板实验结果表明,β-1,4-葡聚糖内切酶基因在重组大肠杆菌中得到了良好的分泌表达;SDS-PAGE电泳图谱表明该酶的分子大小约为73 kDa.

关键词：β-1、4-葡聚糖内切酶、大肠杆菌、短小芽孢杆菌、克隆、表达

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分类号：Q78(基因工程（遗传工程）)

资助基金：广东省工业科技攻关计划项目2005B10401051;广东食品药品职业学院自然科学青年基金资助项目2009YZ005

在线出版日期：2011-03-31（万方平台首次上网日期，不代表论文的发表时间）

页数：共4页

页码：53-55,68