携带 IL-2和 NK4双基因真核共表达载体的减毒沙门菌株的构建

摘要：

目的：构建携带 IL-2/ NK4双基因真核表达载体的减毒沙门菌菌株。方法利用分子克隆技术将 IL-2及 NK4基因分别插入 PIRES-SEQ 质粒 IRES 序列的上下游中,构建为双基因真核共表达载体 pCMV-IL-2-IRES-NK4,将该质粒利用脂质体转染入细胞,采用 ELISA 及 PCR 法检测 pCMV-IL-2-IRES-NK4转染细胞后 IL-2/ NK4基因及蛋白表达情况。将所构建质粒以电转化法转化减毒沙门菌菌株 Ty21a,从而得到能够表达 IL-2/ NK4双基因的重组减毒沙门菌菌株。结果 ELISA 及 PCR 法检测该质粒可在细胞中以较高的效率稳定表达 IL-2及 NK4基因和蛋白；同时表达 IL-2/ NK4双基因的减毒沙门菌菌株 TPIN 构建成功。结论本研究成功构建了携带 IL-2/ NK4双基因的减毒沙门菌菌株。

关键词：白细胞介素 2、沙门菌菌苗、基因、遗传载体

分类号：R186.9(流行病学与防疫)

资助基金：甘肃省科技重大专项1302FKDA039;兰州市科技项目2011-2-60;全国博士后基金20060390192

在线出版日期：2014-08-12（万方平台首次上网日期，不代表论文的发表时间）

页数：共6页

页码：28-32,38