假单胞菌593多铜氧化酶CopA的漆酶活性研究

摘要：

从假单胞菌593中克隆出多铜氧化酶copA基因,并将其转入大肠杆菌BL21(DE3)pLysS过量表达和纯化.纯化的CopA蛋白展示出漆酶活性,针对漆酶的3种底物ABTS、DMP、SGZ,CopA的最适反应pH分别是3.5、7.5和7.5,最适反应温度分别是50℃、50℃和42℃.pH稳定性和热稳定研究发现,在pH7.0条件下,CopA比较稳定,在温度大于42℃保存该蛋白,其活性降低较快.二价金属离子影响实验发现,CopA漆酶活性能被二价铜离子显著加强.酶动力学常数实验结果展示,CopA作用于底物ABTS,Km为0.281 mmol/L,Vmax为3.02×10-3mmol·L-1·min-1,kcat为1.8s-1;CopA作用于底物DMP,Km为0.141 mmol/L,Vmax为4.54×10-3 mmol·L-1·min-1,kcat为2.2 s-1;CopA作用于底物SGZ,Km为0.025 mmol/L,Vmax等于0.7 ×10-3 mmol·L-1·min-1,kcat为0.87 s-1.

关键词：假单胞菌593、细菌漆酶、酶动力学

所属期刊栏目：41

分类号：Q554(酶)

资助基金：农作物重大病虫草害防控湖北省重点实验室开发基金2017ZTSJJ10

在线出版日期：2019-09-19（万方平台首次上网日期，不代表论文的发表时间）

页数：共7页

页码：483-488,493