结合区部分缺失的纤维素酶基因的克隆与表达及酶学性质初步测定

摘要：

从梧桐腐枝上分离到一株可降解纤维素的细菌菌株,发现克隆于该菌株的内切纤维素酶基因(egt)结合区部分缺失(8 bp),导致移码并提前终止,全长1 146 bp,编码381个氨基酸,分子量为40.06 kD.克隆含有完整结合区的基因(eg),通过酶学性质研究,表明两者均仅具有羧甲基纤维素钠活性,纤维素酶EGT和EG的最适反应温度分别为45℃和55℃,EGT更加耐高温.最适pH均为7.0,都具有较好的pH稳定性.Mn2+、Fe2+对两者具有激活作用,Zn2+、Ca2+、K+、NH42+和Mn2+对其都具有抑制作用.EGT的Km=3.09 mg/mL,比酶活为98.4 U/mg;EG的Km=8.654 mg/mL,比酶活为53.53 U/mg.EGT结合区的部分缺失导致酶与底物的亲和能力更好,同时比酶活提高183％,水解能力更强.

关键词：内切纤维素酶、异源表达、结合区、酶学性质

所属期刊栏目：41

分类号：Q182(寄生生物学)

资助基金：湖北省自然科学基金创新群体项目2018CFA019

在线出版日期：2019-09-19（万方平台首次上网日期，不代表论文的发表时间）

页数：共6页

页码：477-482