融合胸腺素α1的猪干扰素α在毕赤酵母中的表达及效价测定

摘要：

猪干扰素α(IFN-α)是在特定条件下由细胞产生的一种具有广谱、高效抗病毒活性的可溶性糖蛋白,胸腺素α1(Tα1)是一种具有免疫调节的活性肽.本研究中将Tα1基因与去掉信号肽序列的猪IFN-α N端融合,构建酵母表达载体PHBM-Tα1-IFNα,同时构建单独表达IFNα的重组质粒PHBM-IFNα,重组质粒电转化至毕赤酵母(Pichia pastoris)菌株,甲醛诱导表达.利用SDS-PAGE法检测融合蛋白的表达,并用细胞病变抑制法测定干扰素的效价.实验结果表明,酵母表达上清中IFNα的效价为2.916×106 U/mL;Tα1-IFNα的效价为2.860×107 U/mL,该结果证实胸腺素α1可提高融合表达蛋白猪干扰素的活性,因此,通过酵母表达体系获得高活性胸腺素-猪干扰素融合蛋白,可为高效、低成本获得抗病毒药物提供一种新的模式.

关键词：干扰素、胸腺素Tα1、毕赤酵母表达系统、细胞病变抑制法

所属期刊栏目：39

分类号：Q939.91;Q782(微生物学)

资助基金：国家自然科学基金31172320、31672561

在线出版日期：2017-07-24（万方平台首次上网日期，不代表论文的发表时间）

页数：共7页

页码：347-353