10.3969/j.issn.1000-2375.2016.02.006
λ噬菌体切除酶基因Xis在大肠杆菌中的可溶性融合表达
λ噬菌体切除酶Xis( excisionase)是调控λ噬菌体溶源裂解转换过程中的一种重要蛋白质.通过密码子优化及两步法将来自λ噬菌体切除酶基因Xis在体外合成,然后克隆到带有类泛素蛋白SUMO标签的定向原核表达载体SUMO-pETG上,测序正确后,然后转化至E.coli BL21( DE3)细胞可溶性表达.经SDS-PAGE及质谱检测证实表达蛋白确实为目的蛋白.该研究通过融合表达λ噬菌体切除酶Xis不仅解除了Xis对E.coli宿主细胞的毒害作用,而且实现在E. coli中的高水平可溶性表达.因此,Xis的大量制备,将会促进Gateway克隆技术的广泛应用.
λ噬菌体切除酶Xis、大肠杆菌、融合表达、鉴定
Q786(基因工程(遗传工程))
国家高技术研究发展计划014AA021303-04
2016-04-07(万方平台首次上网日期,不代表论文的发表时间)
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