E.coli酪氨酸转氨酶的纯化与非天然氨基酸的底物特异性检测

摘要：

构建重组菌株E.coli BL21(DE3)转pET23a-tyrB,IPTG诱导其大量表达,然后依次通过盐析、离子交换层析、疏水层析、凝胶过滤层析获得纯酶,运用薄层层析技术(TLC)检测,结果表明纯化的TyrAT转氨酶对自身底物酪氨酸在37 ℃和50 ℃具有较高活性.分别加入非天然氨基酸L-正缬氨酸、L-新戊基甘氨酸、L-叔亮氨酸、D-正亮氨酸作为底物,检测到TyrAT转氨酶对L-叔亮氨酸在50 ℃下有活性,对D-正亮氨酸在37 ℃和50 ℃均有催化活性,且50 ℃下效果更好.

关键词：酪氨酸转氨酶、纯化、非天然氨基酸、薄层层析

所属期刊栏目：32

分类号：Q786;Q814.1(基因工程（遗传工程）)

资助基金：国家自然科学基金30570009;湖北大学重点基金资助项目资助

在线出版日期：2010-09-21（万方平台首次上网日期，不代表论文的发表时间）

页数：共4页

页码：210-213